تأثير المستخلصات الفينولية لأوراق نبات المرسين على الجرذان المصابة بالسكرى.

Abstract

Phenols present in foods including grains, legumes, vegetables, fruits in addition to some drinks as tea and coffee. They are used as colour and taste food additives. They also have antioxidant and antimicrobial activities. Phenols have vital roles in treatment of various diseases. They are used as analgesics, laxatives or to stand against oxidative stress which are the precaursers of different ailments such as atherosclerosis, cancer in addition to renal failure and diabetes. Diabetes is one of food directly related diseases. It is related to metabolic disorders in carbohydrates, lipids and proteins. The number of diabetics in the world was estimated about 171 millions according to estimations were done at 2000. Treatment of diabetes, usually through food adjustment according to distinct discepline , exercise, orally used drugs, insulin injections, use of medicinal plants or their extracts which are increasingly used nowadays. A lot of medicinal plants of hypoglycemic potential growing in Libya. Al-Jabal Al-Akhdar are so rich with plants which are used forklorally for treatment of diabetes including Cynara species, unripe Ceratonica siliqua, Rubia spp., Salvia spp. and Myrtus communis. The last one which is more commonly used. The plant Myrtus communis is a shrub to ever-green trees growing widely in Al-Jabal Al-Akhdar area between Derna (East) Al-Koof district in the west. It belongs to Family Myrtaceae. The present study was done on the phenolic extracts obtained from Myrtus communis leaves to test their antidiabetic action on diabetic rats. The obtained results showed that total methanol extracted phenols was 13.7% represents 17.5% of total phenols. Detection of TLC chromatograms under UV and after spraying with ferric chloride reagent showed three bands at Rf values 0.1, 0.39 and 0.54. phenolic acids were extracted also after successive extraction of Myrtus leaves. Eleven compounds were detected, they are o.Coumaric, p.Coumaric, Caffeic, Ferulic, Elagic, Iso.Chlorogenic, 3-OH Benzoic, 4-OH- Benzoic ، Sinapic ، Cinnamic ، and m–Coummaric . Total phenolic extract of Myrtus communis, which was identified earlier was given orally to streptozotocin induced diabetic rats at 400 and 800 mg/kg rat body weight, twice aday. Metformin was given as a positive control to another group of rats for comparison with other groups. The results of biochemical analysis showed elevations in glucose/blood concentrations, Alanine transferase, Aspartate transferase blood urea nitrogen, creatinin, total protein, albumin, globulin, total cholesterol, low density lipoprotein (LDL), and decreasing in high density lipoprotein (HDL). Rats which were given phenolic extracts at doses of 800 mg/kg showed results close to that of standard (Metformin) while others received doses of phenolics at 400 mg/kg showed moderate results. It is worth to mention that normal nondiabetic rats received phenolic extrats didn's show hypoglycemic results. Blood sugar concentration in diabetic rats was 495 mg/100 ml was reduced to 131, 143 and 230 for those rats given phenolic extracts at doses 800, 400 mg/kg and those given Metformin, successively. Total cholesterol in diabetic rats was higher than normal, but reduced to normal values in treated diabetic rats (60-100mg \ 100 ml), the lowest values were on using the dose 800 mg of phenolic extracts. The plasma concentration of Low density lipoproteins (LDL) had been increased more than those of high density lipoproteins (HDL) in diabetic rats. On the other hand, the percentage of HDL had been increased in treated rats with phenolic extracts at a dose 800 mg/kg body wt. at a ratio nealy equal to those of normal rats. The percentage of albumin in diabetic rats was reduced, but globulin had increased, total protein concentration was normal(showed no change). The results of biochemical analysis are in good agreement with those histopathological analysis. Necrosis in -cells of pancreas, deterioration in liver and kidney cells of diabetic rats, but at the same time , therewere no significant changes in rats given phenolic extracts at doses of 800 mg/kg rat body weight. It was very close to those received metformin. On the otherhand, rats received phenolics at doses of 400mg/kg showed slight deterioration in liver and kidney cells. At last, the phenolic acids extract of Myrtus communis was chosen as antihyperglycemic in diabetic rats at two dose of 200mg/kg and 400 mg/kg. from results, it was clear that the higher dose showed higher antidiabetic activity after 48 hours from starting treatment in comparison with untreated rats. The percentages of glucose were very close to normal. Percentages of glucose started to rise after cassation of treatment with phenolic acid extract. توجد الفينولات في الأغذية شاملة الحبوب ، البقوليات ، الخضروات والفاكهة ، بالإضافة إلى بعض المشروبات مثل الشاي والقهوة . كما تستعمل كمضافات غذائية مثل بعض المواد الملونة والمكسبة للطعم وأيضاً لها تأثيرات مضادة للأكسدة أو الكائنات الدقيقة. للفينولات دور حيوي في علاج العديد من الأمراض فهي تستخدم كمسكنات أو ملينات أو في الحد من الأكسدة الاجهادية التي قد يترتب عليها العديد من الأمراض مثل تصلب الشرايين ، السرطان بالإضافة إلى أمراض الفشل الكلوي والسكري . مرض السكري هو أحد الأمراض التي ترتبط مباشرةً بالتغذية ويرجع الى خلل في أيض الكربوهيدرات ، الدهون والبروتينات . ويقدر عدد المصابين به في العالم حوالي171 مليون شخص وذلك حسب احصائيات 2000 مسيحي. وعلاجه عادةً يتم عن طريق اتباع نظام غذائي محدد ، التمرينات الرياضية ، استخدام الأدوية التي تعطى بالفم أو الحقن بالإنسولين واستخدام الأعشاب والنباتات الطبية أو مستخلصاتها والتي زاد الاهتمام بها في الآونة الأخيرة . وفي الجماهيرية هناك العديد من النباتات التي تستخدم في علاج مرض السكري منها الجعدة ، الخروب الأخضر ، الروبيا ، المريمية والمرسين ويعد الأخير هو الأكثر استخداماً. وتزخر منطقة الجبل الأخضر بالعديد من النباتات الطبية ومنها نبات المرسين وهو عبارة عن شجيرة دائمة الخضرة تنمو في المنطقة الواقعة بين درنة شرقاً ووادي الكوف غرباً وينتمي إلى العائلة الكافورية Myrtaceae نوع Myrtus communis . أجريت هذه الدراسة على المستخلصات الفينولية لأوراق نبات المرسين ومدى تأثيرها على الجرذان المصابة بالسكري . أوضحت النتائج المتحصل عليها أن عائد استخلاص الفينولات الكلية بالميثانول هو 13.7% وكانت نسبة الفينولات الكلية به 17.5% . كما بينت نتائج الفحص تحت الأشعة فوق البفسجية والرش بكلوريد الحديديك أن هناك ثلاثة حزم مثلت المواد الفينولية المتواجدة بالمستخلص وكانت قيم الـ Rf لها 0.1 ، 0.39 و 0.54. كما استخلصت الأحماض الفينولية بالطريقة المتتابعة من نبات المرسين وتم التعرف على أحد عشر حمض فينولي هي أحماضo.Coumaric، p.Coumaric ، Caffeic ، Ferulic ، Elagic، Iso.Chlorogenic، 3-OH Benzoic ، 4-OH-Benzoic ، Gallic، Cinnamic m–Coumaric . مستخلص الفينولات الكلية السابق توصيفه لأوراق نبات المرسين تم تجريعه بالفم للجرذان المصابة بالسكري والمستحثة بعقار ستربتوزوتوسين (Streptozotocin) ، وذلك عند التركيزين 400 ملجم/كجم و800 ملجم/كجم من وزن الجسم وبمعدل مرتين في اليوم. كما أعطيت مجموعة من الجرذان المصابة بالسكري عقار ميتفورمين (Metformin) للمقارنة مع المجموعات الأخرى . نتائج التحاليل الكيموحيوية أوضحت زيادة كبيرة في نسبة الجلوكوز ، أنزيم آلانين ترانسفيريز (Alanine transferase) ، اسبرتيت ترانسفيريز (Aspartate transferase) ، نيتروجين يوريا الدم ، الكرياتينين ، البروتين الكلي ، الالبيومين ، الجلوبيولين ، الكوليسترول الكلي، كوليستيرول البروتين منخفض الكثافة LDL وكوليستيرول البروتين مرتفع الكثافة HDL وذلك في الجرذان المصابة بالسكري عند مقارنتها بالجرذان الطبيعية . الجرذان التي جرعت بمعدل 800 ملجم / كجم من وزن الجسم بمستخلص الفينولات الكلية أعطت قيم قريبة إلى الطبيعيةأو التي أعطيت عقار ميتفورمين ، بينما الجرذان التي أعطيت 400 ملجم / كجم من وزن الجسم أعطت قيم متوسطة . وتجدر الإشارة إلى أن الجرذان الطبيعية والتي أعطيت مستخلص الفينولات عند تركيز 800 ملجم / كجم من وزن الجسم لم تنخفض نسبة السكر بها وكانت مشابهة للجرذان الطبيعية غير المعاملة . وقد كانت نسبة السكر في الجرذان المصابة بالسكري 495 ملجم / 100 مل دم وانخفضت هذه النسبة إلى 131 ، 143 ، 230 ملجم / 100 مل دم لكل من الجرذان المجرعة 800 ، 400 ملجم / كجم من وزن الجسم والعقار ميتفورمين على التوالي . أما الكوليستيرول الكلي في الجرذان المصابة بالسكري كان أعلى من المعدل الطبيعي، في حين تقع نسبته في الجرذان المعاملة ضمن المعدل الطبيعي (60-100 ملجم / 100 مل دم) وكان أكثرها انخفاضاً هي معاملة 800 ملجم / كجم من وزن الجسم ، ولكن على مستوى الليبوبروتينات منخفضة الكثافة LDL قد زادت نسبتها مقارنة بالأخرى عالية الكثافة HDL في الجرذان المصابة بالسكري ومن الناحية الأخرى زادت نسبة الـ HDL في الجرذان المعاملة (800 ملجم) وكانت قريبة من الطبيعية . ومن ناحية أيض البروتين فإن الجرذان المصابة بالسكري قد انخفض مستوى الالبيومين بها وازداد الجلوبيولين في حين كان مستوى البروتين الكلي في المدى الطبيعي. نتائج التحاليل الكيموحيوية تتوافق بدرجة كبيرة مع نتائج الفحص النسيجي حيث كان هناك نخر (necrosis) لخلايا بيتا في البنكرياس وتلف أو خلل في أنسجة الكبد والكلية للجرذان المصابة بالسكري في حين لم تكن هناك تغيرات واضحة في الجرذان المجرعة (800 ملجم/كجم من وزن الجسم) من مستخلص الفينولات وكانت قريبة إلى الجرذان المعطاة عقار ميتفورمين ومن الناحية الأخرى فإن الجرذان التي جرعت ( 400 ملجم / كجم من وزن الجسم ) مستخلص الفينولات الكلية أظهرت وجود تلف بسيط في خلايا كل من الكبد والكلية . وأخيرا اختبر مستخلص الأحماض الفينولية لنبات المرسين كخافض لسكر الدم في الجرذان المصابة بالسكري وذلك عند تركيزي 200 ملجم / كجم و 400 ملجم / كجم وقد أتضح من النتائج ان التركيز الأخير كان له فعالية عالية كخافض للسكري وذلك بعد 48 ساعة من التجريع مقارنةً بالجرذان التي لم تعطى هذا المستخلص حيث كانت نسبة السكر قريبة إلى النسبة الطبيعية ، وقد ازدادت نسبة السكر مرة أخرى بعد إيقاف المعاملة بمستخلص الأحماض الفينولية.